Evaluation of the level of microbial contamination and prevalence of gram-negative non-fermentative rods in dental unit waterlines

Introduction: The cross infection control in dental office has received great attention from professionals and one of the critical points is the bacteriological control of water used in dental unit. Objective: To perform a microbiological evaluation of the water used in dental units, the identification of Gram-negative non-fermentative rods (GNNR) and their ability to adhere to polystyrene, and the antimicrobial activity of disinfectants on the identified strains. Material and methods: The heterotrophic bacteria count and GNNR identification were performed on water samples collected from 25 dental units (air/water syringe and reservoir). The GNNR were assessed on their capability to adhere to polystyrene and on their antimicrobial activity to the following disinfectants: sodium hypochlorite (0.06%, 0.12%, 0.25%, and0.5%) and chlorhexidine (0.03%, 0.06%, and 0.12%). Results: 88% of the air/water syringe collected samples and 68% of the reservoir collected samples were out of the potability standards. The quantity of isolated bacteria from the reservoir was lower than from the air/water syringe in 88% of the dental units. Methylobacterium spp. was found in highest percentage (19.7%) during GNNR genus isolation. There was a weak adherence to polystyrene in 85.04% of the samples. Sodium hypochlorite at 0.25%, inactivated 100% of the GNNRs in 10 minutes, while the highest tested concentration of chlorhexidine (0.12%), inactivated 98.5% of the GNNRs. Conclusion: These results provide information on the contamination problem of dental unit waterlines (DUWL) and indicate a need for treatment of the water used in dental units. The disinfection of DUWL can be performed with sodium hypochlorite at 0.25% (half the concentration recommended in the literature). However, further studies are necessary regarding DUWL frequency disinfection.

Nasal carriage of methicillin-resistant Staphylococcus aureus in university students

In a study of university students, the percentage nasal carriage of Staphylococcus aureus was 40.8 percent (102/250). Of the isolates, MIC50 of methicillin was 0.5 µg/mL and MIC90 was 1 µg/mL. Six (5.8 percent) isolates were methicillin-resistant and carried the mecA gene. These results suggest that community-associated methicillin-resistant S. aureus may be spreading in Brazil.

Efeito antimicrobiano in vitro da associação de polimixina B e ceftazidima em amostras clínicas de pseudomonas aeruginosa / The in vitro antimicrobial effect of polymyxin b associated with ceftazidime in pseudomonas aeruginosa clinical isolates

A associação de antibióticos é uma alternativa para tratar doenças infecciosas de etiologia polimicrobiana ou causadas por bactérias multirresistentes, como por exemplo, Pseudomonas aeruginosa. No presente estudo, investigamos a atividade antimicrobiana “in vitro” da combinação de polimixina B e ceftazidima, em 20 amostras clínicas de P. aeruginosa. Inicialmente, a concentração inibitória mínima (CIM) dos agentes foi determinada pela técnica de microdiluição em caldo para cada uma das amostras selecionadas. Posteriormente, com base nos valores das CIMs, o efeito antimicrobiano da combinação da polimixina B e ceftazidima foi avaliado por meio do método de “checkerboard”. Os resultados demonstraram que todas as amostras de P. aeruginosa estudadas foram sensíveis à polimixina B, com CIMs variando entre 1 e 2 μg/ml. Em relação à ceftazidima, as CIMsvariaram de 2 a 8 μg/ml, em nove amostras sensíveis, e de 16 a 1.024 μg/ml, em 11 amostras, resistentes a esse antibiótico. Para todas amostras testadas, o efeito antimicrobiano da combinação de polimixina B eceftazidima foi indiferente, sugerindo que esta associação, quando utilizada na forma de terapia combinada invivo, pode não apresentar atividade superior àquela obtida pela monoterapia.

The antibiotics association is an alternative to treat infectious diseases, either caused by polymicrobial etiologyor those caused by multidrug-resistant bacteria, such as Pseudomonas aeruginosa. In this study, the in vitroantimicrobial activity of the polymyxin B and ceftazidime combination was investigated in 20 clinical isolates of P.aeruginosa. Initially, the minimum inhibitory concentration (MIC) of those agents was determined by using thebroth microdilution technique for each of the selected strains. Afterwards, based on MIC values, the antimicrobialeffect of the polymyxin B and ceftazidime combination was evaluated by making use of "checkerboard" method. The results demonstrated that all P. aeruginosa strains studied were sensitive to polymyxin B, with MICs varying from 1 to 2 μg/ml. In relation to ceftazidime, MICs varied from 2 to 8 μg/ml in nine sensitive strains, and from 16 to 1.024 μg/ml in 11 strains resistant to that antibiotic. For all strains tested, the antimicrobial effect of thepolymyxin B and ceftazidime combination was indifferent, thus suggesting that such an association, when used as a combined in vivo therapy, sometimes does not present any activity superior to the one obtained with monotherapy.

La asociación de antibióticos es una alternativa para tratar enfermedades infecciosas de etiología polimicrobianao causadas por bacterias multiresistentes, como por ejemplo Pseudomonas aeruginosa. En el presente estudio, investigamos la actividad antimicrobiana in vitro de la combinación de polimixina B y ceftazidima en 20 muestras clínicas de P. aeruginosa. Inicialmente, la concentración inhibitoria mínima (CIM) de los agentes fue determinada por la técnica de microdiluición en caldo para cada una de las muestras seleccionadas. Posteriormente, con base en los valores de las CIMs, el efecto antimicrobiano de la combinación de la polimixinaB y ceftazidima fue evaluado a través del método de “checkerboard”. Los resultados demostraron que todas lasmuestras de P. aeruginosa estudiadas fueron sensibles a la polimixina B, con CIMs variando entre 1 y 2 μg/ml.En relación con la ceftazidima, las CIMs variaron de 2 a 8 μg/ml en nueve muestras sensibles, y de 16 a 1.024μg/ml en 11 muestras resistentes a ese antibiótico. Para todas las muestras testadas, el efecto antimicrobianode la combinación de polimixina B y ceftazidima fue indiferente, sugiriendo que esta asociación, cuando utilizadaen la forma de terapia combinada in vivo, puede no presentar actividad superior a aquella obtenida por lamonoterapia.

Disinfection of gutta-percha cones with chlorhexidine

This study investigated the effectiveness of detergent and aqueous solutions of 2 percent chlorhexidine digluconate in decontaminating gutta-percha cones (gpc) contaminated with bacteria, yeast, or bacterial spores. Gutta-percha cones were contaminated with 10(7)-10(8) colony-forming units per milliliter (cfu/ml) of the following test organisms: Staphylococcus aureus, Enterococcus faecalis, Escherichia coli, or Candida albicans. Spores of Bacillus subtilis were also tested. Contaminated gpc were treated with the chlorhexidine solutions for 1, 5, 10, or 15 min. Each cone was then transferred to a tube containing saline and the micoorganisms were recovered after homogenization for cfu determination. Both detergent and aqueous chlorhexidine solutions were effective in eliminating S. aureus, E. faecalis, and C. albicans cells adhered on the surface of gpc within 1 min of exposure. E. coli was eliminated in 5 min with detergent solution. The Bacillus subtilis spores were eliminated by chlorhexidine solutions within 5 min. The results of this study demonstrated that both aqueous and detergent solutions of 2 percent chlorhexidine digluconate were effective in decontaminating gpc within 5 minutes of exposure.

No presente estudo foi investigada a eficácia das soluções aquosa e detergente de digluconato de clorexidina a 2 por cento na descontaminação de cones de guta-percha (cgp) contaminados experimentalmente com bactérias, leveduras ou esporos bacterianos. Os cones foram contaminados com 10(7) a 10(8) unidades formadores de colônias por mililitro (ufc/ml) dos seguintes microrganismos teste: Staphylococcus aureus, Enterococcus faecalis, Escherichia coli, ou Candida albicans. Esporos de Bacillus subtilis foram também testados. Os cones contaminados foram tratados com as soluções de clorexidina por, respectivamente, 1, 5, 10 ou 15 min. Cada cone foi então transferido para solução salina e homogeneizado para a determinação das ufc dos microorganismos. As soluções de clorexidina destruíram em 1 min as células de S. aureus, E. faecalis ou de C. albicans aderidas à superfície dos cgp. E. coli foi eliminada em 5 min com a solução detergente. Os esporos de Bacillus subtilis foram eliminados pelas soluções de clorexidina em 5 min. Os resultados deste estudo demonstraram que as soluções aquosa e detergente de clorexidina a 2 por cento foram efetivas na descontaminação dos cones de guta percha em 5 minutos.

Preliminary evaluation of adherence on abiotic and cellular surfaces of Acinetobacter baumannii strains isolated from catheter tips

The cell surface hydrophobicity and adhesion to abiotic and cellular surfaces was tested in five clinical strains of Acinetobacter baumannii isolated from catheter tips. Biochemical and molecular characteristics of these strains were also studied. Hydrophobicity was characterized by a test for affinity to xylene. Adhesion to abiotic surfaces (polystyrene, formica, latex and glass) was evaluated in Petri plates using the stamp technique. Buccal epithelial cells were used for tests of adhesion to cellular surfaces. Adhesion to the catheter was evaluated by repeatedly rinsing the catheters and rolling them over nutrient agar. Molecular typing of the strains was done by the ERIC-PCR technique. The degree of hydrophobicity of the strains varied from hydrophobic to hydrophilic. All the strains adhered to the cell surfaces and to the catheters, and three of them strongly adhered to latex, polystyrene and formica. Catheter adhesion was reduced by meropenem. We found a direct relationship between the degree of bacterial hydrophobicity and adhesion to the abiotic surfaces, but not with adhesion to cellular surfaces, which suggests that different mechanisms are involved in adherence.

Stpahylococcus aureus biofilms on central venous haemodialysis catheters

As infecções devido a biofilmes bacterianos são comuns em pacientes sob tratamento em hemodiálise. Neste estudo, 16 pacientes (7 homens, 9 mulheres, de 22 a 81 anos, média 50 anos de idade), com um total de 25 cateteres de hemodiálise (3 de triplo-lúmen e 22 de duplo-lúmen) de poliuretano inseridos em veia subclávia foram estudados. Os cateteres permaneceram no local de 3 a 91 dias (média de 47 dias). Os cateteres foram removidos devido ao: mau funcionamento (44%), suspeita de infecção relacionada ao cateter (20%), viabilidade de um acesso permanente (16%), remoção acidental (12%), sinais e sintomas de infecção no local da inserção do cateter (4%) e contaminação exógena (4%). Culturas positivas de ponta foram observadas em sete cateteres (28%), concomitantemente com três culturas positivas de sangue. Das culturas de sangue foram identificados Staphylococcus aureus (12%) e de uma das conexões foi isolado S. aureus. Biofilmes foram observados sobre todas as pontas de cateteres. Os S. aureus isolados do sangue e cateter (ponta e conexão) eram resistentes a pencilina e sensíveis a azitromicina, ciprofloxacina, clindamicina, cloranfenicol, gentamicina, oxacilina, rifampicina, sulfametoxazole, tetraciclina e vancomicina. As cepas de S. aureus isoladas de sangue, ponta de cateter e conexão foram consideradas idênticas devido à coincidência do perfil de sensibilidade. E similaridade genética, avaliada por meio de ribotipagem.

The effectiveness of alcohol gel and other hand-cleansing agents against important nosocomial pathogens

Nós comparamos a eficácia do álcool gel com a dos tradicionais agentes degermantes preconizados para a lavagem das mãos na remoção de amostras clínicas de Acinetobacter baumannii, Staphylococcus aureus resistente a meticilina, Escherichia coli, Enterococcus faecalis, Pseudomonas aeruginosa e Candida albicans das mãos artificialmente contaminadas. As pontas dos dedos dos voluntários (n=6) foram contaminadas com aproximadamente 106 de células/microrganismo teste. A seguir, as mãos foram lavadas com sabonete líquido não medicamentoso, álcool gel, álcool etílico 70 per center (concentração por peso) e soluções anti-sépticas detergentes de polivinilpirrolidona-iodo a 10 per center (PVP-I) e de gluconato de clorhexidina 4 per center. Os experimentos foram realizados segundo um quadrado latino com seis blocos aleatorizados 6 x 5. Os resultados foram estimados por ANOVA. Os produtos reduziram de 93,83 per center (sabão líquido) a 100 per center (PVP-I 10 per center) a população microbiana aplicada nas mãos. Em 4 dos 6 microrganismos testes analisados, o PVP-I 10 per center, o álcool gel, o álcool etílico 70 per center e a clorhexidina 4 per center mostraram uma taxa de remoção significantemente superior a do sabão líquido (P < 0,05). Os resultados confirmam a eficácia do álcool gel na higienização das mãos e sugerem que o PVP-I 10 per center, o álcool gel, o álcool etílico 70 per center e a clorhexidina 4 per center podem ser os agentes mais eficazes do que o sabão líquido não medicamentoso na remoção de Acinetobacter baumannii, Escherichia coli, Enterococcus faecalis e Candida albicans das mãos altamente contaminadas.

Uso do método de cultura semi-quantitativa para estudo de bacteriemia relacionada ao cateter venoso central utilizado por pacientes em hemodiálise / Use of semiquantitative culture method to study bacteremia with central venous catheter related in hemodialysis patients

As infecções são as principais complicações resultantes do uso de cateter venoso central. Nesta pesquisa 25 pontas de cateter venoso central retiradas de veia subclávia de 16 pacientes ambulatoriais em tratamento de hemodiálise foram analisadas por cultura semi-quantitativa. Hemoculturas foram realizadas pelo sistema Bactec 9050. Os resultados obtidos por cultura semi-quantitativa mostraram que 10(40%) das pontas foram colonizadas (> 15 UFC) pelos seguintes microrganismos 3 (30%) Staphylococcus aureus, 2 (20%) Staphylococcus warneri, 1 (10%), Staphylococcus epidermidis, 1 (10%), Stenotrophomonas maltophilia e 3 (30%) bacilos difteróides. Das culturas de sangue foram isolados microrganismos identificados como Staphylococcus aureus.A bacteriemia foi observada em 12% dos pacientes e 40% das pontas dos cateteres estudados estavam colonizados.

Adaptaçäo dos métodos da contagem na gota e da alça calibrada para a contagem de lactobacilos e estreptococos do grupo mutans da saliva / Adaptation of drop-plate and calibrated loop methods for enumerating lactobacilli and mutans streptococci group of saliva

Apesar de se encontrar amplamente reconhecido a importância do emprego dos testes de contagem de lactobacilos e de estreptococos do grupo mutans da saliva para avaliar o risco de pacientes à cárie dentária, no Brasil, por fatores técnicos e econômicos estes testes säo pouco utilizados na prática odontológica e também pouco divulgados junto aos laboratórios de análises clínicas. Com objetivo de investigar uma técnica simplificada para quantificar estes microrganismos na saliva, comparamos as adaptaçöes das técnicas da contagem na gota e da alça calibrada com os métodos padröes de contagem de lactobacilos e estreptococos do grupo mutans. Foram analisados 30 espécimes de saliva estimulada, obtidos de 30 indivíduos que apresentaram alto (n = 20), médio (n = 6) e baixo (n = 4) risco de cárie. Näo houve diferenças significativas entre os resultados da contagem (p>0,05), indicando que as adaptaçöes das técnicas da contagem na gota e da alça calibrada descritas em nosso estudo podem ser empregadas no laboratório de análises clínicas como uma alternativa simplificada e de baixo custo para a contagem de lactobacilos e de estreptococos do grupo mutans da saliva

Remoção de Serratia marcescens (Enterobacteriaceae) das mãos pelo uso de diferentes agentes degermantes / Removal of Serratia marcescens (Enterobacteriaceae) from hands contaminated with different degermants

Foi investigado o efeito imediato do sabão, álcool etílico 70 por cento, polivinilpirrolidona-iodo 10 por cento (PVP-I) e clorhexidina 4 por cento na remoção de uma amostra de Serratia marcescens aplicada nas mãos de cinco voluntários. Utilizou-se como modelo experimental um quadrado latino contendo dois blocos aleatorizados 5 x 4. No primeiro bloco (baixa contaminação), a taxa de remoção de Serratia marcescens (Enterobacteriaceae) das mãos, expressa pelo fator de redução logarítmica (FRL), foi de 2,77 para o PVP-I e o álcool, 2,38 para a clorhexidina e de 1,88 para o sabão. Não houve diferença entre os tratamentos (P > 0,05). No segundo bloco (alta contaminação), o PVP-I (FRL = 5,71) e o álcool (FRL = 5,08) foram mais eficientes do que a clorhexidina (FRL = 2,80) e o sabão (FRL = 2,48) (P < 0,05). Os resultados sugerem que o PVP-I e o álcool podem ser mais eficazes na remoção de Serratia marcescens das mãos altamente contaminadas

Descontaminação rápida de cones de guta-percha com álcool iodado / Rapid decontamination of gutta-percha cones with alcohol iodine

Em um estudo de laboratório, foi investigada a eficácia do álcool iodado na descontaminação de cones de guta-percha contaminados com células (Staphylococcus aureus, Enterococcus faecalis, Escherichia coli) ou com esporos (Bacillus subtilis) bacterianos. Os cones contaminados foram tratados durante 1, 5, 10 e 15 minutos pelo álcool iodado nas concentrações de 0,3 por cento a 3 por cento e enxaguados com álcool éter. Cada cone foi transferido para tubos de ensaio contendo solução salina, homogeneizando-se essa suspensão durante 30 segundos, para a remoção e a contagem dos microrganismos sobreviventes. O álcool iodado nas concentrações de 0,3 por cento, de 1 por cento, de 2 por cento e de 3 por cento destruiu, em 1 minuto, as células bacterianas aderidas à superfície dos cones de guta-percha, mas não eliminou os esporos em 15 minutos de exposição. Os resultados obtidos nas condições experimentais do presente estudo não confirmam a indicação do álcool iodado, nas concentrações de 0,3 por cento, de 1 por cento, de 2 por cento ou de 3 por cento para a descontaminação rápida de cones de guta-percha

Análise bacteriológica da água de equipos odontológicos / Bacteriological analysis of water in dental units

Nos últimos anos, grande esforço tem sido feito para conscientizar os profissionais da saúde sobre a importância dos processos de esterilização e anti-sepsia. Entretanto, pouca atenção tem sido dispensada pelos cirurgiões-dentistas à qualidade da água utilizada na prática odontológica. Neste trabalho, realizamos 72 analises bacteriológicas em amostras de água de 68 equipos odotitológicos e de 4 torneiras, para verificar a qualidade microbiológica da água, através da contagem de bactérias heterotróficas e pesquisa de coliforines. As amostras coletadas das torneiras apresentaram valores compatíveis com os padrões de potabilidade. Das 68 amostras obtidas dos equipos 63 (92,7 por cento) estavam contaminadas e 5 (7,3 por cento) estavam dentro dos padrões de potabilidade. Observou-se que 42 equipos (61,8 por cento) continham água acentuadamente contaminada, 14 (20,6 por cento) apresentaram índice moderado de contaminação e 7 (10,3 por cento) estavam com a água levemente contaminada. Estes resultados apontam a necessidade de cuidados especiais, tais como a descontaminação e a desinfecção periódica dos sistemas de água dos equipos

Ocorrência de estirpes de Staphylococcus aureus resistentes à oxacilina em servidores hospitalares / Occurrence of oxacilin-resistant Staphylococcus aureus strains in hospital personnel

O estudo da ocorrência de Staphylococcus aureus resistentes à oxacilina em servidores hospitalares mostrou prevalência de portadores de 14//(16/112). A distribuiçäo de portadores em relaçäo aos sítios amostrados foi: mäos 12//, vestíbulos nasais 10//, e orofaringe 2//. Todas as cepas apresentaram-se poli-resistentes. A maioria delas foi classificada no fagogrupo III, incluindo tipos fágicos epidêmicos hospitalares

Ocorrência de Clostriduim difficile nas fezes de crianças do Rio de Janeiro / Occurence of Clostriduim difficile in fecal samples of children in Rio de Janeiro, RJ

A ocorrência de Clostridium difficile foi analisada em amostras de fezes de 175 crianças com idade variando de 1 a 35 meses. Para o isolamento primário do microrganismo foi empregado o meio de cultura seletivo diferencial "CCFA" (cicloserina-cefositina-frutose-agar). Num grupo de 67 crianças sem distúrbios gastrintestinais e que näo estavam sob uso de agentes antimicrobianos a ocorrência do C.difficile foi de 22,4%, enquanto que num outro grupo de 28 crianças nas mesmas condiçöes, porém, sob tratamento com antimicrobianos, a ocorrência do microrganismo foi de 50%. Num terceiro grupo de 58 crianças com diarréia e sob antibiotico-terapia a ocorrência de C.difficile atingiu 13,8%. Este mesmo percentual foi encontrado num grupo de 22 crianças com diarréia, porém, sem tratamento com agentes antimicrobianos. De um modo geral, os maiores índice de ocorrneica de C.difficile foram encontrados em crianças com idade variando entre 1 a 12 meses (28,1%). Indices inferiores foram verificados entre crianças com idade superior a 1 ano. Outrossim, os resultados evidenciam que crianças com distúrbios gastrintestinais apresentam menor incidência deste microrganismo nas fezes. Por outro lado, näo houve diferença estatisticamente significativa entre pos grupos de crianças com e sem terapia antimicrobiana